ការណែនាំអំពីវប្បធម៌កោសិកា ដើម្បីស្វែងយល់បន្ថែម

1. តើវប្បធម៌កោសិកាគឺជាអ្វី?
វប្បធម៌កោសិកា សំដៅលើការយកកោសិកាចេញពីសត្វ ឬរុក្ខជាតិ ហើយបន្ទាប់មកបណ្តុះពួកវានៅក្នុងបរិយាកាសសិប្បនិម្មិតអំណោយផល។កោសិកាអាចត្រូវបានយកចេញដោយផ្ទាល់ពីជាលិកា ហើយបំបែកដោយមធ្យោបាយអង់ស៊ីម ឬមេកានិក មុនពេលដាំដុះ ឬពួកវាអាចមកពីខ្សែកោសិកា ឬខ្សែកោសិកា។

២.តើវប្បធម៌បឋមជាអ្វី?
វប្បធម៌បឋម សំដៅលើដំណាក់កាលវប្បធម៌ បន្ទាប់ពីកោសិកាត្រូវបានបំបែកចេញពីជាលិកា ហើយរីកដុះដាលក្រោមលក្ខខណ្ឌសមស្រប រហូតដល់ពួកវាកាន់កាប់ស្រទាប់ខាងក្រោមដែលមានទាំងអស់ (ពោលគឺឈានដល់ចំណុចប្រសព្វ)។នៅដំណាក់កាលនេះ កោសិកាត្រូវតែត្រូវបានបង្រួបបង្រួមដោយផ្ទេរពួកវាទៅធុងថ្មីដែលមានឧបករណ៍ផ្ទុកលូតលាស់ស្រស់ ដើម្បីផ្តល់កន្លែងបន្ថែមសម្រាប់ការលូតលាស់បន្ត។

2.1 បន្ទាត់ក្រឡា
បន្ទាប់ពី subculture ទីមួយ វប្បធម៌បឋមត្រូវបានគេហៅថា cell line ឬ subclone ។ខ្សែកោសិកាដែលបានមកពីវប្បធម៌បឋមមានអាយុកាលកំណត់ (ឧទាហរណ៍ ពួកវាមានកម្រិត សូមមើលខាងក្រោម) ហើយនៅពេលដែលពួកវាឆ្លងកាត់ កោសិកាដែលមានសមត្ថភាពលូតលាស់ខ្ពស់បំផុតបានគ្របដណ្ដប់ ដែលបណ្តាលឱ្យមានកម្រិតជាក់លាក់នៃហ្សែននៅក្នុងចំនួនប្រជាជនដែលប្រកាន់ខ្ជាប់នូវ phenotype ។

2.2 សំពាធកោសិកា
ប្រសិនបើចំនួន subpopulation នៃបន្ទាត់កោសិកាមួយត្រូវបានជ្រើសរើសជាវិជ្ជមានពីវប្បធម៌ដោយការក្លូន ឬវិធីសាស្រ្តផ្សេងទៀត នោះបន្ទាត់កោសិកានឹងក្លាយទៅជាកោសិកា។ប្រភេទកោសិកាជាធម្មតាទទួលបានការផ្លាស់ប្តូរហ្សែនបន្ថែមបន្ទាប់ពីបន្ទាត់មេចាប់ផ្តើម។

3. បន្ទាត់កោសិកាមានកំណត់ និងបន្ត
កោសិកាធម្មតាជាធម្មតាបែងចែកតែចំនួនកំណត់ប៉ុណ្ណោះ មុនពេលបាត់បង់សមត្ថភាពក្នុងការរីកសាយ។នេះ​ជា​ព្រឹត្តិការណ៍​ដែល​កំណត់​ដោយ​ហ្សែន​ដែល​គេ​ហៅ​ថា​ភាព​ចាស់​ទុំ;បន្ទាត់កោសិកាទាំងនេះត្រូវបានគេហៅថាបន្ទាត់កោសិកាកំណត់។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ខ្សែកោសិកាមួយចំនួនក្លាយជាអមតៈតាមរយៈដំណើរការដែលហៅថាការផ្លាស់ប្តូរ ដែលអាចកើតឡើងដោយឯកឯង ឬអាចត្រូវបានបង្កឡើងដោយសារធាតុគីមី ឬមេរោគ។នៅពេលដែលបន្ទាត់ក្រឡាកំណត់មួយឆ្លងកាត់ការបំប្លែង និងទទួលបានសមត្ថភាពក្នុងការបែងចែកដោយគ្មានកំណត់ វាក្លាយជាបន្ទាត់កោសិកាបន្ត។

4. លក្ខខណ្ឌវប្បធម៌
លក្ខខណ្ឌ​វប្បធម៌​នៃ​ប្រភេទ​កោសិកា​នីមួយៗ​គឺ​មាន​ភាព​ខុស​គ្នា​ខ្លាំង ប៉ុន្តែ​បរិយាកាស​សិប្បនិម្មិត​សម្រាប់​ការ​បណ្ដុះ​កោសិកា​គឺ​តែង​តែ​មាន​ធុង​សមស្រប​ដែល​មាន​ដូច​ខាង​ក្រោម៖
4.1 ស្រទាប់ខាងក្រោម ឬឧបករណ៍ផ្ទុកវប្បធម៌ដែលផ្តល់សារធាតុចិញ្ចឹមសំខាន់ៗ (អាស៊ីតអាមីណូ កាបូអ៊ីដ្រាត វីតាមីន សារធាតុរ៉ែ)
4.2 កត្តាលូតលាស់
4.3 អរម៉ូន
4.4 ឧស្ម័ន (O2, CO2)
4.5 បរិយាកាសរូបវន្ត និងគីមីនិយតកម្ម (pH, សម្ពាធ osmotic, សីតុណ្ហភាព)

កោសិកាភាគច្រើនពឹងផ្អែកលើយុថ្កា ហើយត្រូវតែត្រូវបានបណ្តុះនៅលើស្រទាប់ខាងក្រោមរឹង ឬពាក់កណ្តាលរឹង (វប្បធម៌ adherent ឬ monolayer) ខណៈពេលដែលកោសិកាផ្សេងទៀតអាចលូតលាស់អណ្តែតក្នុងកម្រិតមធ្យម (វប្បធម៌ព្យួរ)។

5. ការអភិរក្សគ្រីប
ប្រសិនបើមានកោសិកាលើសនៅក្នុង subculture ពួកគេគួរតែត្រូវបានព្យាបាលដោយភ្នាក់ងារការពារសមស្រប (ដូចជា DMSO ឬ glycerol) ហើយរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពក្រោម -130 ° C (cryopreservation) រហូតដល់ពួកគេត្រូវការ។សម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែមអំពី subculture និង cryopreservation នៃកោសិកា។

6.Morphology នៃកោសិកាក្នុងវប្បធម៌
កោសិកានៅក្នុងវប្បធម៌អាចត្រូវបានបែងចែកជាបីប្រភេទជាមូលដ្ឋានដោយផ្អែកលើរូបរាងនិងរូបរាងរបស់វា (ឧទាហរណ៍ morphology) ។
6.1 កោសិកា Fibroblasts គឺ bipolar ឬ multipolar មានរាងពន្លូត និងលូតលាស់ភ្ជាប់ទៅនឹងស្រទាប់ខាងក្រោម។
6.2 កោសិកាដែលមានរាងដូចអេពីធីលីល មានរាងពហុកោណ មានទំហំធម្មតាជាង ហើយត្រូវបានភ្ជាប់ទៅម៉ាទ្រីសក្នុងសន្លឹកដាច់ដោយឡែក។
6.3 កោសិកាដូច Lymphoblast មានរាងស្វ៊ែរ ហើយជាធម្មតាលូតលាស់នៅក្នុងការព្យួរដោយមិនភ្ជាប់ទៅនឹងផ្ទៃ។

7. កម្មវិធីនៃវប្បធម៌កោសិកា
វប្បធម៌កោសិកាគឺជាឧបករណ៍សំខាន់មួយដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងជីវវិទ្យានៃកោសិកា និងម៉ូលេគុល។វាផ្តល់នូវប្រព័ន្ធគំរូដ៏ល្អមួយសម្រាប់ការសិក្សាអំពីសរីរវិទ្យា និងជីវគីមីនៃកោសិកាធម្មតា (ដូចជាការស្រាវជ្រាវមេតាបូលីស ភាពចាស់) ផលប៉ះពាល់នៃថ្នាំ និងសារធាតុពុលលើកោសិកា និងឥទ្ធិពលនៃការផ្លាស់ប្តូរកោសិកា និងសារធាតុបង្កមហារីក។វាក៏ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការពិនិត្យ និងការអភិវឌ្ឍន៍ថ្នាំ និងការផលិតទ្រង់ទ្រាយធំនៃសមាសធាតុជីវសាស្រ្ត (ដូចជាវ៉ាក់សាំង ប្រូតេអ៊ីនព្យាបាល)។អត្ថប្រយោជន៍ចម្បងនៃការប្រើវប្បធម៌កោសិកាសម្រាប់កម្មវិធីណាមួយទាំងនេះគឺភាពស៊ីសង្វាក់គ្នា និងការផលិតឡើងវិញនៃលទ្ធផលដែលអាចទទួលបានដោយប្រើបណ្តុំនៃកោសិកាដែលបានក្លូន។